?液体样本??总蛋白提取试剂

货号：ZK-PL3505

规格：100次

描述：

本试剂盒可能在15分钟内对液体样品中的蛋白进行提取浓缩，，，，，，，，或脱盐、脱去垢剂、脱还原剂等。。。。。。。合用于各类液体样品(10?L～1L)，，，，，，，，如蛋白溶液、胞浆胞核蛋白提取液、细胞或微生物造就基上清液、血液、尿液、脑脊液等各类体液；；；；；；也适于从细胞悬液提取总蛋白。。。。。。。蛋白回收率95-100%，，，，，，，，远高于经典的丙酮或三氯醋酸沉淀法，，，，，，，，且可有效去除样品中的脂质，，，，，，，，不影清脆续SDS-PAGE和Western Blot等生物尝试。。。。。。？？？？？？？？捎1.5ml离心管微量提取也可大规模造备，，，，，，，，轻便高效。。。。。。。

组成和保留:

浓缩试剂50ml，，，，，，，，合用100x 100ml次浓缩提取。。。。。。。4℃保留 12个月有效

合用样品：

1. 液体样品如蛋白溶液、胞浆胞核蛋白提取液、细胞或微生物造就基上清液、血液、尿液、脑脊液等各类体液。。。。。。。2. 原代或传代细胞悬液，，，，，，，，可按液体方式提取总蛋白。。。。。。。

蛋白提取法式

微量提取加样量及比例 液体蛋白样品 (ml)     10      100      150

提取试剂 (ml)                                            50      500      750

H2O (ml)                                                  30      300      450

1. 每100ml液体蛋白样品，，，，，，，，按比例加5倍体积(500ml) 提取试剂，，，，，，，，振荡混匀，，，，，，，，室温静置3分钟。。。。。。。蛋白浓度较高时，，，，，，，，会很快产生凝聚导致溶液浑浊。。。。。。。

2. 10,000g 4℃离心3分钟。。。。。。。蛋白浓度较高时可省略此步骤。。。。。。。

3. 打开管口，，，，，，，，参与3倍体积(300 ml)的纯水，，，，，，，，振荡混匀。。。。。。。

4. 10,000g 4℃离心3分钟。。。。。。。溶液分为两相。。。。。。。蛋白在两相中央，，，，，，，，浓度高时会形成薄膜状或沉淀于管底；；；；；；浓度低时则肉眼难以看到。。。。。。。

5. 幼心汲取上层相，，，，，，，，弃去。。。。。。。把稳应该保留肯定量的上层相，，，，，，，，以免吸走中央相的蛋白膜。。。。。。。

6. 参与500 ml 无水乙醇，，，，，，，，振荡洗涤沉淀。。。。。。。10,000g 4℃离心2分钟。。。。。。。弃上清，，，，，，，，再次瞬时离心数秒并吸去管内液体。。。。。。。勿触动管底的蛋白沉淀(量少时沉淀不私见)。。。。。。。

7. 敞开管口，，，，，，，，空气天然干燥。。。。。。。

8. 凭据样品蛋白初始浓度，，，，，，，，加适量双蒸水或上样缓冲液，，，，，，，，95℃煮5分钟溶化蛋白沉淀。。。。。。。

把稳

1. 可室温操作。。。。。。。1 mg/ml总蛋白可被有效沉淀，，，，，，，，更低浓度的蛋白可参与白蛋白做载体援手沉淀。。。。。。？？？？？？？？捎行コ禾逖分械难(1M)、还原剂(1%巯基乙醇

或DTT)、去垢剂(5%SDS、1% Triton X-100、1% NP-40、油脂等。。。。。。。若是上述成分浓度过高，，，，，，，，用水稀释后进行提取。。。。。。。干燥蛋白沉淀可4℃或－20℃持久保

存。。。。。。。

2. 血浆蛋白或疏水蛋白溶化较慢，，，，，，，，反复数次95℃煮并加以－20℃冻融可助溶。。。。。。。必要时4℃溶化过夜，，，，，，，，或用2% SDS溶化沉淀，，，，，，，，95℃煮，，，，，，，，而后离心去除不

溶化物。。。。。。。

3. 如定量蛋白应使用不含溴酚蓝的凝胶上样缓冲液溶化沉淀，，，，，，，，蛋白定量后再参与溴酚蓝。。。。。。。

4. 提取造就细胞总蛋白：用蒸馏水或1% SDS造备肯定体积的细胞悬液，，，，，，，，振荡裂解细胞，，，，，，，，而后执行上述液体样品蛋白提取法式。。。。。。。

5. 实体组织的蛋白提取可使用P1250实体组织和细胞蛋白抽提试剂盒。。。。。。。

6. 提取试剂有刺激性，，，，，，，，一旦接触立即用水洗濯。。。。。。。