?植物总蛋白提取试剂

货号：ZK-PL3506?

描述：

植物组织成分复杂含有较多的酚类物质、多糖、色素、次生代谢产品，，，，，，这使得植物蛋白质的分离提取变得难题。。。。。。。。本试剂合用于多种植物根、茎、叶及果实等的新鲜或冻存组织，，，，，，可能急剧有效地提取植物中的可溶性和疏水性蛋白成分，，，，，，有效去除组织中所含的多糖、脂质、今生代谢产品等滋扰蛋白钻研的成分，，，，，，同时可能使提取的蛋白质处于最佳的活性状态和检测状态，，，，，，合用于酶学活性测定，，，，，，单向、双向蛋白电泳、Western Blot和免疫共沉淀等尝试。。。。。。。。

合用领域：

提取多种植物组织和细胞如苹果、花生、土豆、烟叶、菠菜、梅花等。。。。。。。。

贮存：

4?C避光保留，，，，，，12个月有效

规格：

50ml  100ml

操作步骤；；；；；；

1. 组织匀浆，，，，，，必须充分匀浆，，，，，，这一步极度关键。。。。。。。。

（1） 冻存组织匀浆：预先将研钵至于-20?C或-70?C冰箱内预冷。。。。。。。。取液氮冻存的植物组织，，，，，，放入冰冻的研钵内研磨成粉末，，，，，，把稳使样本处于冰冻状态，，，，，，如样本色彩加深或变黑通常批注已经消融。。。。。。。。将研磨好的组织转移到新管，，，，，，按每200mg植物组织加0.5mL比例参与提取试剂，，，，，，混匀后冰上搁置20分钟，，，，，，期间可数次颠倒混匀，，，，，，使蛋白溶化。。。。。。。。

（2） 新鲜组织匀浆：取新鲜组织放入研钵中，，，，，，按每200mg植物组织加0.5mL比例参与提取试剂，，，，，，充分研磨至匀浆液中看不到大的块状或者片状组织，，，，，，保障样本齐全研磨破碎。。。。。。。。转移至离心管内，，，，，，冰上搁置20分钟。。。。。。。。

2. 离心：12000g离心15分钟，，，，，，将上清液转移至新的离心管中，，，，，，直接使用或-70?C贮存。。。。。。。。

3. 后续处置：

（1） 若是进行酶学测定，，，，，，直接取蛋白上清液参与反映。。。。。。。。

（2） 沉淀蛋白；；；；；；首先估计造备的蛋白上清液体积。。。。。。。。步骤一：加1/3体积30%三氯醋酸水溶液；；；；；；步骤二：参与6-10倍体积的1:1混合的丙酮/乙醇,-20?C沉淀1幼时或过夜。。。。。。。。4?C，，，，，，5000g离心10分钟，，，，，，弃上清，，，，，，空气略干沉淀，，，，，，用适量的1*SDS上样缓冲液溶化沉淀，，，，，，95 ?C变性5分钟，，，，，，上样电泳。。。。。。。。适于进行SDS-PAGE、Western Blot、双向电泳等。。。。。。。。

（3） 直接电泳：需参与4*SDS上样缓冲液。。。。。。。。上清如有少量色素通常不会影响蛋白电泳。。。。。。。。

（4） 免疫共沉淀：用蒸馏水等比例稀释提取的蛋白上清，，，，，，进行免疫共沉淀。。。。。。。。

（5） 蛋白定量：用BCA蛋白定量试剂盒进行定量

常见问题集解决步骤：

1. 提取的蛋白量少：

1）组织蛋白含量较少，，，，，，如水果等，，，，，，可增长组织量；；；；；；

2）组织匀浆不充分，，，，，，如纤维较多的组织破碎较难题，，，，，，应适当耽搁研磨功夫；；；；；；

3）组织过老或水分迷失以至其干燥，，，，，，应尽量选用新鲜较嫩的组织；；；；；；

4）甲醇或丙酮沉淀后蛋白溶化不充分，，，，，，应耽搁溶化功夫或使用较强的蛋白溶化剂。。。。。。。。

2. 蛋白质量欠安：

1）提取的蛋白有多酚或色素等杂质残留，，，，，，可沉复用丙酮或甲醇沉淀；；；；；；

2）蛋白质降解，，，，，，操作个步骤应迅速，，，，，，在冰上进行，，，，，，用户也能够自行选择参与蛋白酶抑造剂。。。。。。。。