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AO/EB双荧光染色试剂盒
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AO/EB双荧光染色试剂盒

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?AO/EB双荧光染色试剂盒

产品货号:ZK-L0608

产品规格:100T

产品简介:

细胞凋亡(Apoptosis)的检测步骤有状态学、生物化学、DNA片段化检测步骤以及TUNEL等象征片段化DNA步骤 ,,,,,,,,但从细胞凋亡概想产生的汗青及正确性方面思考 ,,,,,,,,使用显微镜进行的状态学观察也是很沉要的。 。。。。细胞殒命的检测能够通过荧光色素染色分辨活细胞、死细胞 ,,,,,,,,测定细胞代谢活性和状态学观察。 。。。。这些步骤都是利用细胞凋亡这种情况进行测定的 ,,,,,,,,因而不一 定反映现实情况 ,,,,,,,,MTT法是测定线粒体中特有酶的活性 ,,,,,,,,反映细胞数主张变动 ,,,,,,,,其了局与细胞殒命的数量不定齐全一致。 。。。。

Acridine Orange属于三环杂芳香燃料 ,,,,,,,,能够象征DNA、RNA ,,,,,,,,属于异染性荧光染料 ,,,,,,,,AO常用于细胞内DNA和RNA进行检测 ,,,,,,,,AO与核酸结合方式重要有:1、插入性结合 ,,,,,,,,AO嵌入核酸双链的碱基对之间 ,,,,,,,,这种结合方式重要为AO与DNA的结合 ,,,,,,,,其荧光发射峰为530nm ,,,,,,,,引发后呈绿色荧光 ;; ;;;; ;2、静电吸引 ,,,,,,,,带正电荷的AO与单链核酸的磷酸根(带负电荷)产生静电间的吸引结合 ,,,,,,,,这种结合方式重要为AO与RNA的结合 ,,,,,,,,其荧光发射峰为640nm ,,,,,,,,引发后呈红色荧光 ,,,,,,,,少量结合会呈桔黄色或桔红色荧光。 。。。。因而AO嵌合到双链DNA分子中显绿色 ,,,,,,,,与DNA单链或RNA结应时发橙红色荧光 ;; ;;;; ;Ethidium Bromide嵌合到双链DNA或RNA的碱基对中 ,,,,,,,,无碱基特异性 ,,,,,,,,发红色荧光 ;; ;;;; ;AO可透度日细胞膜 ,,,,,,,,EB不能通过与活细胞膜拥有一样通透性的细胞膜。 。。。。

 

产品组成:

                          编号

名称

ZK-L0608

100T

Storage

试剂(A): AO Solution

200μl

4℃ 避光

试剂(B): EB Solution

200μl

RT

试剂(C): AO/EB Dilution Buffer

50ml

4℃ 避光

使用说明书

1份

 

 

自备资料:

荧鲜明微镜

PBS

细胞计数板

载玻片、盖玻片

 

 

操作步骤(仅供参考):

网络细胞 ,,,,,,,,用PBS洗濯细胞1次 ,,,,,,,,参与适量的PBS沉悬细胞 ,,,,,,,,计数并调节细胞浓度至(0.2~5)×106/ml。 。。。。

配造AO/EB工作液:取适量的试剂(A)、试剂(B)、试剂(C) ,,,,,,,,依照试剂(A):试剂(B):试剂(C)=1:1:8的比例稀配造成AO/EB工作液。 。。。。

每25~50μl细胞悬液中参与AO/EB工作液2μl ,,,,,,,,混合均匀 ,,,,,,,,试问孵育5~15min。 。。。。

取干净载玻片 ,,,,,,,,滴加上5~10μl细胞悬液 ,,,,,,,,轻轻盖上盖玻片。 。。。。

在荧鲜明微镜B域进行观察。 。。。。

 

染色了局:

活细胞

绿色荧光

死细胞

橙色荧光

 

当苦衷项:

1、用能通度日细胞膜与DNA结合后发蓝色荧光的Hoechst 33342和只能通过死细胞与DNA结合后发红色荧光的Propidium Iodide对细胞进行双染的步骤也比力常用。 。。。。

如有低温离心理进行离心成效更佳。 。。。。

操作过程中该把稳削减试剂(A)、试剂(B)露出于强光下的功夫。 。。。。

EB Solution有毒性 ,,,,,,,,请幼心操作。 。。。。

为了您的安全和健全 ,,,,,,,,请穿尝试服并戴一次性手套操作。 。。。。

 

有效期: 6个月有效。 。。。。4℃运输 ,,,,,,,,4℃保留。 。。。。

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