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?AO荧光染色试剂盒
产品货号:ZK-L0607
产品规格:100T
产品简介:
Acridine Orange, AO属于三环杂芳香燃料,,,,,能够象征DNA、RNA,,,,,属于异染性荧光染料。。。。。。。。该染料拥有膜通透性,,,,,能透过细胞膜,,,,,使核DNA和RNA染色。。。。。。。。因而AO常用于细胞内DNA和RNA进行检测。。。。。。。。AO与核酸结合方式重要有:
1、插入性结合,,,,,AO嵌入核酸双链的碱基对之间,,,,,这种结合方式重要为AO与DNA的结合,,,,,其荧光发射峰为530nm,,,,,引发后呈绿色荧光;;;;;;;;
2、静电吸引,,,,,带正电荷的AO与单链核酸的磷酸根(带负电荷)产生静电间的吸引结合,,,,,这种结合方式重要为AO与RNA的结合,,,,,其荧光发射峰为640nm,,,,,引发后呈红色荧光,,,,,少量结合会呈桔黄色或桔红色荧光。。。。。。。。因而,,,,,吖啶橙嵌合到双链DNA分子中显绿色,,,,,与DNA单链或RNA结应时发桔黄色或橙红色荧光。。。。。。。。
AO染色试剂盒(Acridine Orange Detection Kit)重要由AO Stain、AO Stain Buffer组成,,,,,常用于细胞凋亡的检测。。。。。。。。染色后在荧鲜明微镜下观察,,,,,吖啶橙可透过正常细胞膜,,,,,使细胞核呈绿色或黄绿色均耘撰光;;;;;;;;而在凋亡细胞中,,,,,因染色质固缩或断裂为大幼不等的片段,,,,,形成凋亡幼体。。。。。。。。AO使其染上致密浓染的黄绿色荧光或黄绿色碎片颗粒;;;;;;;;而坏死细胞黄荧光减弱甚至隐没。。。。。。。。AO染色常与EB染色合用双染,,,,, EB只染死细胞使之产生桔黄色荧光,,,,,由此可分辨出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。。。。。。。。
产品组成:
编号 名称 | ZK-L0607 100T | Storage |
试剂(A): AO Stain | 500μl | 4℃ 避光 |
试剂(B): AO Stain Buffer(10×) | 10ml | 4℃ |
使用说明书 | 1份 | |
自备资料:
荧鲜明微镜
低速离心理
PBS
细胞计数板
载玻片、盖玻片
操作步骤(仅供参考):
(一) AO单独染色
网络细胞(选取流式细胞仪检测时,,,,,应先固定细胞),,,,,用AO Stain Buffer(1×)洗濯细胞1次,,,,,参与适量的AO Stain Buffer(1×)沉悬细胞,,,,,计数并调节细胞浓度至106/ml。。。。。。。。
取适量的细胞悬液和AO Stain,,,,,依照细胞悬液:AO Stain=19:1的比例混合,,,,,轻轻混匀。。。。。。。。若是选取荧鲜明微镜下观察,,,,,通常取95μl细胞悬液和5μlAO Stain混合即可。。。。。。。。
室温避光染色15min,,,,,滴加于载玻片上并加盖玻片或上 流式细胞仪分析。。。。。。。。
荧鲜明微镜下观察(引发滤光片波长488nm,,,,,阻断滤光片波长515nm),,,,,计数并拍照。。。。。。。。
染色了局
正常细胞 | 细胞被均匀染成黄绿色荧光 |
凋亡细胞 | 染色质浓缩,,,,,细胞核碎裂成点状,,,,,被染成大幼不一、致密浓染的绿色颗粒 |
(二) AO/EB双染色
网络细胞,,,,,用AO Stain Buffer(1×)洗濯细胞1次,,,,,参与适量的AO Stain Buffer(1×)沉悬细胞,,,,,计数并调节细胞浓度至106/ml。。。。。。。。
取适量的细胞悬液和AO Stain,,,,,依照细胞悬液:AO Stain=19:1的比例混合,,,,,并参与适量EB染色液,,,,,轻轻混匀。。。。。。。。若是选取荧鲜明微镜下观察,,,,,通常取95μl细胞悬液和5μl AO Stain混合即可。。。。。。。。
室温避光染色15min,,,,,滴加于载玻片上并加盖玻片
荧鲜明微镜滤光片515nm观察,,,,,计数并拍照。。。。。。。。
染色了局
正常细胞 | 均匀染成绿色荧光 |
坏死细胞 | 细胞桔黄色荧光 |
凋亡细胞 | 染色质浓缩,,,,,细胞核碎裂,,,,,被染成大幼不一、致密浓染的黄绿色颗;;;;;;;;蚣恃孔赐黄稹。。。。。。。 |
推算细胞凋亡率和殒命率:
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当苦衷项:
AO染色常与EB染色合用,,,,,可分辨出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。。。。。。。。
如有低温离心理进行离心成效更佳,,,,,同时该把稳削减试剂露出于强光下的功夫。。。。。。。。
为了您的安全和健全,,,,,请穿尝试服并戴一次性手套操作。。。。。。。。
有效期: 6个月有效。。。。。。。。
?0755-28715175/33164177
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