BCA蛋白定量试剂盒

英文名称：BCA Protein Assay Kit

别    名：BCA Kit; bicinchoninic acid;   
规格：30ml  50ml  100ml

保留前提：Store at -20℃.

产品介绍 ：

蛋白质定量是蛋白质钻研的基础工作之一。。。。。。。。BCA (bicinchoninic acid)是梦想的蛋白质定量步骤；；；；；；；是当前比Lowry法更优越的专用于检测总蛋白质含量的产品。。。。。。。。该步骤以急剧活络、不变靠得住，，，，，，，，对分歧种类蛋白质检测的变异系数极度幼而倍受专业人士的青睐。。。。。。。。BCA法测定蛋白浓度不受绝大部门样品中的化学物质的影响。。。。。。。。在组织细胞裂解尝试中，，，，，，，，常用浓度的去垢剂SDS，，，，，，，，Triton X-100，，，，，，，，Tween不影响检测了局，，，，，，，，但受螯合剂(EDTA，，，，，，，，EGTA)、还原剂（DTT，，，，，，，，巯基乙醇）和脂类的影响。。。。。。。。尝试中，，，，，，，，若发现样品稀释液或裂解液自身布景值较高，，，，，，，，可试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。。。。。。。。该产品不受此影响，，，，，，，，因而与之共同使用，，，，，，，，可免去您尝试中的很多烦恼。。。。。。。。

根基道理：碱性前提下，，，，，，，，蛋白将Cu2+还原为Cu+，，，，，，，， Cu+与BCA试剂形成紫色彩的络合物，，，，，，，，测定其在562nm处的吸收值，，，，，，，，并与尺度曲线对比，，，，，，，，即可推算待测蛋白的浓度。。。。。。。。
BCA试剂的蛋白质测定领域是10－2000ug/ml

使用注明：
1. 配造工作液: 凭据尺度品和样品数量，，，，，，，，按体积比A ：B （50：1）配造适量BCA工作液，，，，，，，，充分混匀。。。。。。。。BCA工作液室温24幼时内不变。。。。。。。。
2. 稀释尺度品：取10微升尺度品用PBS稀释至100ul（尺度品通常可用PBS稀释），，，，，，，，使终浓度为0.5mg/ml。。。。。。。。将尺度品按0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20ul加到96孔板的蛋白尺度品孔中，，，，，，，，加PBS补足到20ul。。。。。。。。
3. 加适当体积样品到96孔板的样品孔中，，，，，，，，补加PBS到20ul。。。。。。。。
4. 各孔参与200ul BCA工作液，，，，，，，，37℃搁置30分钟。。。。。。。。
5. 冷却到室温，，，，，，，，用酶标仪562nm测定OD值，，，，，，，，凭据尺度曲线推算出蛋白浓度。。。。。。。。

当苦衷项：
1. 在低温前提或持久保留出现沉淀时，，，，，，，，可搅拌或37℃温育使溶化, 如发现细菌传染则应抛弃。。。。。。。。
2. 样品中若含有EDTA、EGTA、DTT、硫酸铵、脂类会影响检测了局，，，，，，，，请试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒；；；；；；；高浓度的去垢剂也影响尝试了局，，，，，，，，可用TCA沉淀去除滋扰物质。。。。。。。。
3．要得到更为精确的蛋白浓度了局，，，，，，，，每个蛋白梯度和样品均需做复孔, 每次均应做尺度曲线。。。。。。。。
4．当试剂A和B混应时可能会有浑浊，，，，，，，，但混匀后就会隐没，，，，，，，，工作液在密关情况下可保留1周。。。。。。。。
5．需筹备37℃水浴或温箱、酶标仪或通常分光光度计，，，，，，，，测定波长为540-595nm之间，，，，，，，，562nm最佳。。。。。。。。酶标仪需与96孔酶标板配套使用。。。。。。。。使用分光光度计测定蛋白浓度时，，，，，，，，试剂盒测定的样品数量会因而而减 少。。。。。。。。使用温箱孵育时，，，，，，，，该把稳预防因水粉蒸发影响检测了局。。。。。。。。