?人凝血因子VIII（FVIII）ELISA检测试剂盒

货号：ZK-H4121
品牌：乐投letou生物ZIKER；；；；；；；
检测步骤：酶联免疫分析检测法；；；；；；；
规格：48T/96T；；；；；；；
包装：盒；；；；；；；
有效期：6个月；；；；；；；
保留温度： 2-8℃;
利用领域：仅供科研钻研尝试使用，，，，，，，不成用于临床诊断使用；；；；；；；
可检测样品大局：血清/血浆/组织匀浆/细胞造就上清/有关生物液体。。。。。。

样品网络、处置及保留步骤
1.  血清：使用不含热原和内毒素的试管，，，，，，，操作过程中预防任何细胞刺激，，，，，，，网络血液后，，，，，，，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速幼心地分离。。。。。。
2.  血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。。。。。。3000转离心30分钟取上清。。。。。。
3.  细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。。。。。。
4.  组织匀浆：将组织参与适量生理盐水捣碎。。。。。。3000转离心10分钟取上清。。。。。。
5.  保留：若是样本网络后不实时检测，，，，，，，请按一次用量分装，，，，，，，冻存于-20℃，，，，，，，预防反复冻融，，，，，，，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。。。。。。

自备物品
1.酶标仪（450nm）
2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱

操作当苦衷项
1.  试剂盒保留在2-8℃，，，，，，，使用前室温平衡20分钟。。。。。。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，，，，，，，这属于正常景象，，，，，，，水浴加热使结晶齐全溶化后再使用。。。。。。
2.  尝试中不用的板条应立即放回自封袋中，，，，，，，密封（低温干燥）保留。。。。。。
3.  预处置后的样本无需稀释，，，，，，，直接取50μL加样即可。。。。。。
4.  严格依照说明书中表明的功夫、加液量及挨次进行温育操作。。。。。。
5.  所有液体组分使用前充分摇匀。。。。。。

试剂盒组成
名称 96孔配置 48孔配置 备注
微孔酶标板 12孔×8条 12孔×4条 无
阴性对照 0.5mL 0.5mL 无
阳性对照 0.5mL 0.5mL 无
检测抗体-HRP 10mL 5mL 无
20×洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书进行稀释
底物A 6mL 3mL 无
底物B 6mL 3mL 无
终止液 6mL 3mL 无
封板膜 2张 2张 无
说明书 1份 1份 无
自封袋 1个 1个 无

试剂的筹备
 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，，，，，，，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。。。。。。

洗板步骤
1.  手工洗板：甩尽孔内液体，，，，，，，每孔加满洗涤液，，，，，，，静置1min后甩尽孔内液体，，，，，，，在吸水纸上拍干，，，，，，，如此洗板5次。。。。。。
2.  自动洗板机：每孔注入洗液350μL，，，，，，，浸泡1min，，，，，，，洗板5次。。。。。。
操作步骤
1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，，，，，，，渣滓板条用自封袋密封放回4℃。。。。。。
2.  设置阴、阳性对照孔和样本孔，，，，，，，阴、阳性对照孔中参与阴性对照、阳性对照各50μL；；；；；；；
3.  待测样本孔加待测样本50μL；；；；；；；
4.  随后阴、阳性对照孔和样本孔中每孔参与辣根过氧化物酶（HRP）象征的检测抗体100μL，，，，，，，用封板膜封住反映孔，，，，，，，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。。。。。。
5.  弃去液体，，，，，，，吸水纸上拍干，，，，，，，每孔加满洗涤液，，，，，，，静置1min，，，，，，，甩去洗涤液，，，，，，，吸水纸上拍干，，，，，，，如此沉复洗板5次（也可用洗板机洗板）。。。。。。
6.  每孔参与底物A、B各50μL，，，，，，，37℃避光孵育15min。。。。。。
7.  每孔参与终止液50μL，，，，，，，15min内，，，，，，，在450nm波利益测定各孔的OD值。。。。。。

了局判断
 1.  试验有效性：阳性对照孔OD值均匀值≥1.00；；；；；；；
                阴性对照孔OD值均匀值≤0.15。。。。。。
2.  临界值（Cut off）推算：临界值=阴性对照孔均匀值+0.15
3.  阴性判断：样品OD值＜临界值（Cut off），，，，，，，样品为阴性
4.  阳性判断：样品OD值＞临界值（Cut off），，，，，，，样品为阳性

试剂盒机能
1. 正确性：阳性对照孔OD值均匀值≥1.00；；；；；；；阴性对照孔OD值均匀值≤0.15，，，，，，，注明试验了局有效。。。。。。
2. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反映。。。。。。
3. 沉复性：板内、板间变异系数均幼于15%。。。。。。
4. 贮藏：2-8℃，，，，，，，避光防潮保留。。。。。。
5. 有效期：6个月
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