?总铁离子含量比色法检测试剂盒

货号：ZK-PL3972

规格：100次
300次

?描述：铁是人体必须的元素之一，，，，，，，对人体的新陈代谢和身段健全拥有沉要作用，，，，，，，血液中铁的含量不及，，，，，，，就会造成缺铁性血虚。。。。。。。铁存在于人体所有的细胞内，，，，，，，各组织、器官蕴含各内排泄腺都含有铁。。。。。。。肝脏、脾脏和肺组织内含量较为丰硕。。。。。。。成人体内含铁3～5克，，，，，，，大部门都以蛋白质复合物大局存在，，，，，，，极少部门以离子的状态存在。。。。。。。本试剂盒选取亚铁嗪比色法能够定量细胞铁离子，，，，，，，线性领域5~300uM。。。。。。。产品蕴含尺度品和空缺对照。。。。。。。

组成：

1. 细胞裂解液： 20ml

2. 缓冲液： 5ml

3. 检测剂： 3ml

4. 尺度品： 1ml

5. 稀释用液： 20ml

贮存：4℃保留，，，，，，，6个月有效。。。。。。。

合用领域：该试剂盒可用于造就细胞中铁离子定量检测。。。。。。。

用户自备：4.5%高锰酸钾溶液5ml（4.5%为质量体积比）。。。。。。。

操作步骤：

1. 样品筹备（以两百万细胞数为例）：网络细胞，，，，，，，而后用预冷的PBS 洗两遍，，，，，，，将PBS吸弃，，，，，，，参与100-200ul裂解液，，，，，，，剧烈震荡或涡旋20-30S，，，，，，，置于摇床裂解2h，，，，，，，12000rpm 5min 取上清进行后续铁离子浓度测定和蛋白浓度测定。。。。。。。

把稳；；；；；；；；摇床裂解后，，，，，，，若是样本粘稠，，，，，，，请使用超声破碎仪超声，，，，，，，12000rpm 5min 取上清。。。。。。。

2. 尺度品的稀释：用试剂盒提供的稀释用液将3mM 的尺度品母液稀释为：300uM、150uM、75uM、37.5uM、18.75uM、9.38uM、4.69uM。。。。。。。把稳倍比稀释并设置0浓度对照反映管。。。。。。。

3. 将缓冲液与4.5%高锰酸钾溶液按1:1混匀，，，，，，，称为混液A。。。。。。。

4. 参考下表，，，，，，，设置空缺对照管、尺度品管和样品管。。。。。。。若是样品中的铁元素含量过高，，，，，，，用裂解液适当稀释后再进行测定。。。。。。。

5. 混匀，，，，，，，60℃ 孵育1h。。。。。。。

6. 冷却至室温，，，，，，，将管盖与管壁上的液滴离心入管底。。。。。。。

7. 参与30ul 铁离子检测剂，，，，，，，混匀，，，，，，，室温孵育30min，，，，，，，12000rpm 5min 取上清。。。。。。。

温馨提醒：若是样本中出现络合物请先震荡混匀，，，，，，，12000rpm 5min 取上清

8. 取200ul或适当体积 于96孔板，，，，，，，在550nm测定吸光度。。。。。。。若是不能测定550nm，，，，，，，也能够在540nm~580nm领域内检测。。。。。。。

9. 绘造尺度曲线并推算铁离子浓度。。。。。。。

10. 建议用BCA步骤测定步骤1中样本上清中的蛋白浓度，，，，，，，进行铁离子浓度校对。。。。。。。

注明：

1. 本试剂盒不受锰离子、镁离子、镍离子和锌离子等的滋扰。。。。。。。
2. 操作过程中，，，，，，，样品与试剂等预防与铁器接触，，，，，，，以防传染。。。。。。。

3. 所测样本的值高于尺度曲线的上限，，，，，，，应稀释样品后沉新测定。。。。。。。

4. 为了您的安全和健全，，，，，，，请穿尝试服并戴一次性手套操作，，，，，，，检测试剂有侵蚀性，，，，，，，请幼心操作，，，，，，，若失慎沾到皮肤上请顿时用净水冲刷干净。。。。。。。

5. 该试剂盒仅供科学钻研使用。。。。。。。