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加强型膜再生液(抗体去除液、抗体剥离液,,,,,,碱性)
加强型膜再生液(抗体去除液、抗体剥离液,, ,,,,碱性)
加强型膜再生液(抗体去除液、抗体剥离液,, ,,,,碱性)

加强型膜再生液(抗体去除液、抗体剥离液,, ,,,,碱性)

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?加强型膜再生液(抗体去除液、抗体剥离液,, ,,,,碱性)

货号:ZK-PL3707

规格:500ml

描述:

膜再生液,, ,,,,也称做抗体剥离液体、一抗二抗去除液。。。。。。。允许对统一张膜进行屡次Western Blot检测。。。。。。。在室温前提下,, ,,,,将用过的膜浸泡在膜再生液中孵育适其功夫,, ,,,,可能选择性断根与膜抗原结合的第一抗体及第二抗体,, ,,,,但不影响电转移到膜上的蛋白。。。。。。。随后能够使用分歧的抗体进行下一轮Western Blot尝试,, ,,,,可利用统一张膜进行屡次蛋白检测。。。。。。。不仅合合用少量样品屡次检测多种分歧蛋白,, ,,,,即便样品量并不匮乏,, ,,,,选取这种屡次检测统一张膜上的蛋白的战术,, ,,,,能省去给药处置、蛋白电泳和膜转移等耗费性步骤。。。。。。。


合用:硝酸纤维素膜或PVDF膜。。。。。。。使用前膜能够保留在PBS或TBS缓冲液,, ,,,,也能够室温干燥保留数月。。。。。。。干的PVDF膜应该吓酌甲醇泡5分钟。。。。。。。


安全性:

无毒无味。。。。。。。依照通常化学品安全规范进行操作和措置。。。。。。。


贮存:

室温保留,, ,,,,一年有效。。。。。。。温度过低可能出现浑浊。。。。。。。


操作步骤:

1. 将膜充分浸泡于适当体积的再生液中,, ,,,,于摇床上室温孵育6~8分钟。。。。。。。孵育功夫的长短应参考后面的注明进行优化。。。。。。。

2. 用镊子取出膜,, ,,,,用自备Western Blot洗涤缓冲液或普利莱封关洗涤缓冲液洗膜三次,, ,,,,每次8分钟。。。。。。。

3. 此时膜上抗体已去除,, ,,,,膜已再生。。。。。。。用脱脂奶粉或BSA封关,, ,,,,进行下一轮Western Blot尝试。。。。。。。


注明:

1. 膜再生或Stripping的内容是在不影响膜上结合的抗原的前提下,, ,,,,将与抗原分子结合的一抗和二抗洗脱下来。。。。。。。有很多成分影响抗体从膜上的洗脱,, ,,,,

如膜的类型、抗体类型和浓

度及其与抗原结合个性等。。。。。。。按下面的注明优化再生液中孵育膜的功夫至关沉要。。。。。。。

2. 确定膜上抗体是否去除与优化再生液中孵育膜的功夫:用ECL工作液孵育再生后的膜约1分钟,, ,,,,而后进行X光胶片曝光并显影,, ,,,,可确定膜上的抗体是

否齐全去除。。。。。。。如显示条

带,, ,,,,批注抗体未齐全去除,, ,,,,应持续将膜浸泡在再生液中孵育。。。。。。。而后再次ECL 查抄膜上抗体是否去除。。。。。。。沉复此步骤直到抗体齐全去除并确定最佳孵育时

间。。。。。。。

3. 由于至今尚不明显的原因,, ,,,,使用脱脂奶粉封关的膜要比使用BSA封关的膜上的抗体更容易被Strip下来。。。。。。。因而筹备进行Strip的膜,, ,,,,应该使用脱脂奶

粉而不是BSA封关。。。。。。。

4. 尽量预防使用干燥保留的膜,, ,,,,由于干的膜上的抗体很难被Strip干净。。。。。。。

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