?细菌总蛋白非变性提取试剂

货号：ZK-PL3510

产品描述：

细菌蛋白提取试剂Ⅰ(非变性)选取和善的非离子型去污剂，，，，，，，可能从细菌中提获得到可溶性蛋白，，，，，，，用细菌蛋白提取试剂Ⅰ(非变性)造备的蛋白产品维持了生物学活性，，，，，，，合用于后续的Western Blot、免疫沉淀、免疫共沉淀、蛋白纯化等尝试。。。。。。。

合用领域：

从新鲜或者冻存的细菌中提取蛋白。。。。。。。

规格：

25ml 或 100mL.

贮存:

4℃保留 12个月有效

提取步骤：

1. 将细菌造就物在预先称沉的离心管中4?C，，，，，，，5000g离心15分钟，，，，，，，网络菌体；；；；；；

2. 去上清，，，，，，，称量菌体沉量，，，，，，，依照每克菌体参与10-50ml细菌蛋白提取试剂Ⅰ(非变性)，，，，，，，涡旋震荡使菌体齐全沉悬；；；；；；

3. 室温孵育15-20分钟（孵育功夫可凭据细胞类型的分歧做调整)。。。。。。。若是蛋白表白量低，，，，，，，建议结合超声粉碎，，，，，，，置冰上后，，，，，，，选取300w,10s超声/10s距离,超声20min，，，，，，，至菌液变清；；；；；；若主张蛋白不不变，，，，，，，可冰孵，，，，，，，且功夫能够削减，，，，，，，裂解液内参与0.2倍体积50%甘油也能够不变主张蛋白。。。。。。。

4. 15000g，，，，，，，离心10分钟；；；；；；

5. 将上清转移至新的离心管中，，，，，，，即得到可溶性蛋白，，，，，，，可利用BCA法进行蛋白定量及后续尝试。。。。。。。

把稳：

1. 该抽提试剂中不含有蛋白酶抑造剂，，，，，，，用户可凭据具体情况增长蛋白酶抑造剂、还原剂、螯合剂等。。。。。。。

2. 当提取物粘度较高或提取的蛋白以宽恕体大局存在时，，，，，，，建议在参与溶菌酶和DNaseⅠ.

3. 若是在提取纯化过表白蛋白的过程中，，，，，，，得到的大部门蛋白都在沉淀中，，，，，，，那么主张蛋白可能以宽恕体的大局存在，，，，，，，可使用宽恕体蛋白溶化液进行溶液，，，，，，，也能够优化蛋白表白前提，，，，，，，增长可溶性蛋白的表白。。。。。。。