?细胞凋亡-Hoechst染色试剂盒

产品货号：ZK-L0604

产品规格：100T

产品简介：

细胞凋亡-Hoechst染色试剂盒(Hoechst Staining Kit)是一种选取经典的Hoechst33258进行细胞凋亡检测的急剧轻便的试剂河祝。。。。。当细胞产生凋亡时，，，，，染色质会固缩，，，，，Hoechst33258染色后在荧鲜明微镜下观察，，，，，正常细胞的细胞核呈正常的蓝色，，，，，而凋亡细胞的细胞核会呈致密浓染，，，，，或呈碎块状致密浓染，，，，，色彩有些发白。。。。。。

Hoechst Staining Kit时时用于造就的贴壁或悬浮细胞以及组织切片的细胞凋亡检测。。。。。。该试剂盒检测细胞含量领域通常为0.1～1×106之间。。。。。。

产品组成：

自备资料：

1、 可观察蓝光的荧鲜明微镜或激光共聚焦显微镜

2、 PBS或生理盐水

3、 载玻片、盖玻片

4、 预冷固定液：预冷的70%乙醇或4%多聚甲醛

操作步骤(仅供参考)：

(一)贴壁细胞

1、取干净盖玻片在70%乙醇中浸泡5min或更长功夫，，，，，无菌超净台内吹干或用无菌的PBS或生理盐水洗涤3次，，，，，再用细胞造就液洗涤1次。。。。。。将盖玻片置于6孔板或其他造就皿内，，，，，接种细胞造就过夜，，，，，使融合率约为50%～80%。。。。。。

2、参与过问前提使细胞产生凋亡后，，，，，吸尽造就液，，，，，参与Hoechst固定液0.5ml，，，，，固定10min或更长功夫(可4℃过夜)。。。。。。

3、去除固定液，，，，，用PBS或生理盐水洗2次，，，，，每次3min，，，，，吸尽液体。。。。。。洗涤时宜用摇床，，，，，或手动晃悠。。。。。。

4、参与Hoechst染色液0.5ml，，，，，孵育5min(也可用摇床或手动晃悠数次)。。。。。。

5、弃染色液，，，，，用PBS或生理盐水洗2次，，，，，每次3min，，，，，吸尽液体。。。。。。洗涤时宜用摇床或手动晃悠。。。。。。

6、滴一滴抗荧封片剂于载玻片上，，，，，盖上贴有细胞的盖玻片，，，，，让细胞接触封片剂，，，，，尽量预防气泡。。。。。。

7、荧鲜明微镜可检测到呈蓝色的细胞核，，，，，引发波长350nm左右，，，，，发射波长460nm左右。。。。。。

(二)悬浮细胞

1、离心网络细胞样品于1.5ml离心管内并弃液，，，，，参与Hoechst固定液0.5ml，，，，，缓缓悬起细胞，，，，，固定10min或更长功夫(亦可4℃过夜)。。。。。。

2、低速离心去除固定液，，，，，用PBS或生理盐水洗2次，，，，，每次3min。。。。。。洗涤时手动晃悠数次。。。。。。

3、低速离心离心后吸去大部门液体保留约50μl液体，，，，，再缓缓悬起细胞，，，，，滴加至载玻片上，，，，，尽量使细胞散布均匀。。。。。。

4、稍晾干，，，，，使细胞贴在载玻片上不易随液体流动。。。。。。

5、滴加Hoechst染色液0.5ml，，，，，孵育5min，，，，，用吸水纸从边缘吸去液体，，，，，微晾干。。。。。。

6、弃染色液，，，，，用PBS或生理盐水洗2次，，，，，每次3min，，，，，吸尽液体。。。。。。洗涤时宜用摇床，，，，，或手动晃悠。。。。。。

7、滴一滴抗荧光封片剂于载玻片上，，，，，盖上一干净的盖玻片，，，，，尽量预防气泡。。。。。。

8、荧鲜明微镜可检测到呈蓝色的细胞核，，，，，引发波长350nm左右，，，，，发射波长460nm左右。。。。。。

(三)组织切片

1、通例包埋切片。。。。。。

2、用PBS或生理盐水洗2次，，，，，每次3min。。。。。。洗涤时手动晃悠数次。。。。。。

3、均匀滴上Hoechst染色液0.5ml，，，，，孵育5分钟。。。。。。

4、弃染色液，，，，，用PBS或生理盐水洗2次，，，，，每次3min，，，，，吸尽液体。。。。。。洗涤时宜用摇床或手动晃悠。。。。。。

7、将切片置于载玻片上，，，，，滴一滴抗荧光封片剂，，，，，盖上一干净的盖玻片，，，，，尽量预防气泡。。。。。。

8、荧鲜明微镜可检测到呈蓝色的细胞核，，，，，引发波长350nm左右，，，，，发射波长460nm左右。。。。。。

当苦衷项：

1、 荧光染料都存在淬灭的问题，，，，，建议染色后尽快检测。。。。。。使用抗荧封片剂时也应避光操作。。。。。。

2、 在为了获得细胞沉淀的离心的过程中，，，，，对于特殊细胞，，，，，若是细胞沉淀不充分，，，，，能够适当提高离心力或耽搁离心功夫。。。。。。

3、 Hoechst染色液对人体有刺激性，，，，，请把稳适当防护。。。。。。

4、 为了您的安全和健全，，，，，请穿尝试服并戴一次性手套操作。。。。。。

有效期： 12个月有效。。。。。。亦可4℃保留, 1个月有效。。。。。。