植物ADPG焦磷酸化酶(AGP)ELISA检测试剂盒
货号:ZK-P6303
规格:48T/96T
服务:提供免费代测服务
植物ADPG焦磷酸化酶(AGP)ELISA检测试剂盒货号:
ZK-P6303品牌:乐投letou生物ZIKER;;;;;;
检测步骤:酶联免疫分析检测法;;;;;;
规格:48T/96T;;;;;;
包装:盒;;;;;;
有效期:6个月;;;;;;
保留温度: 2-8℃;
利用领域:仅供科研钻研尝试使用,,,,,,,,不成用于临床诊断使用;;;;;;
可检测样品大局:叶片、叶茎、叶杆、根部等植物组织样本。。。。。。。。
一、检测领域、 OD值:具体请征询在线客服 ,,,,,,,,或者来电索要具体说明书!
二、需自备试剂和器材
1. 尺度规格酶标仪。。。。。。。。
2. 自动洗板机。。。。。。。。
3. 37℃恒温箱。。。。。。。。
4. 系列可调节移液器及吸头,,,,,,,,一次检测样品较多时,,,,,,,,最好用多通路移液器。。。。。。。。
5. 使用中性 PBS 或 TBS 作为洗涤液。。。。。。。。
6 蒸馏水。。。。。。。。
7. 吸水纸。。。。。。。。
三、样品的筹备和保留
植物组织的提。。。。。。。。,,,,,,,不论是根茎组织还是叶片组织还是果实组织,,,,,,,,都应该选取鲜沉的计沉方式:
通常要遵循以下准则:
1,,,,,,,,称取的组织沉量不能低于50mg。。。。。。。。
2,,,,,,,,匀浆的比例依照10%,,,,,,,,即1g组织加9ml的匀浆液,,,,,,,,匀浆液通常拔取PBS(PH=7.2-7.4)
3,,,,,,,,组织在匀浆器匀浆过程中,,,,,,,,匀浆液应该分2次加进去,,,,,,,,这样匀浆更充分。。。。。。。。
4,,,,,,,,充分匀浆实现后离心取上清,,,,,,,,离心理的转数拔取2000-3000转每分,,,,,,,,转数不宜超过5000.离心功夫为15-30分钟!
四、操作当苦衷项
1. 试剂盒保留在2-8℃,,,,,,,,使用前室温平衡20分钟。。。。。。。。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,,,,,,,,这属于正常景象,,,,,,,,水浴加热使结晶齐全溶化后再使用。。。。。。。。
2. 尝试中不用的板条应立即放回自封袋中,,,,,,,,密封(低温干燥)保留。。。。。。。。
3. 浓度为0的S0号尺度品即可视为阴性对照或者空缺;;;;;;依照说明书操作时样本已经稀释5倍,,,,,,,,最终了局乘以5才是样本现实浓度。。。。。。。。
4. 严格依照说明书中表明的功夫、加液量及挨次进行温育操作。。。。。。。。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。。。。。。。。
五、洗板步骤
1、手工洗板:甩尽孔内液体,,,,,,,,每孔加满洗涤液,,,,,,,,静置1min后甩尽孔内液体,,,,,,,,在吸水纸上拍干,,,,,,,,如此洗板5次。。。。。。。。
2、自动洗板机:每孔注入洗液350μL,,,,,,,,浸泡1min,,,,,,,,洗板5次。。。。。。。。
六、尝试具体操作法式
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,,,,,,,,渣滓板条用自封袋密封放回4℃。。。。。。。。
2. 设置尺度品孔和样本孔,,,,,,,,尺度品孔各加分歧浓度的尺度品50μL;;;;;;样本孔加待测样本50μL。。。。。。。。
3. 样本孔先加待测样本10μL,,,,,,,,再加样本稀释液40μL;;;;;;空缺孔不加。。。。。。。。
4. 除空缺孔表,,,,,,,,尺度品孔和样本孔中每孔参与辣根过氧化物酶(HRP)象征的检测抗体100μL,,,,,,,,用封板膜封住反映孔,,,,,,,,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。。。。。。。。
5. 弃去液体,,,,,,,,吸水纸上拍干,,,,,,,,每孔加满洗涤液,,,,,,,,静置1min,,,,,,,,甩去洗涤液,,,,,,,,吸水纸上拍干,,,,,,,,如此沉复洗板5次(也可用洗板机洗板)。。。。。。。。
6. 每孔参与底物A、B各50μL,,,,,,,,37℃避光孵育15min。。。。。。。。
7. 每孔参与终止液50μL,,,,,,,,15min内,,,,,,,,在450nm波利益测定各孔的OD值。。。。。。。。
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七、了局判断:
绘造尺度曲线:在Excel工作表中,,,,,,,,以尺度品浓度作横坐标,,,,,,,,对应OD值作纵坐标,,,,,,,,绘造出尺度品线性回归曲线,,,,,,,,按曲线方程推算各样本浓度值。。。。。。。。
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