铜绿假单胞菌ATCC9027
商品类别：微生物检测与质控菌种
货 号 ：ATCC9027
用处：用于阳性对照，，，，，，，造就基质量节造

规 格 ：支

微生物检测冻干质控菌种铜绿假单胞菌ATCC9027使用说明书：

1 复苏菌种前应筹备适于该菌种成长的固体、液体造就基和造就设备，，，，，，，所有操作均应在切合生物安全保唬；；；；；；ぜ拔蘧疤嵯陆。。。。。。。

2 启开菌种铜绿假单胞菌 ATCC9027前，，，，，，，用75%酒精棉消毒西猎炜表表。。。。。。。在无菌前提下，，，，，，，按铝盖上的箭头方向打开塑盖，，，，，，，撕开铝盖，，，，，，，打开西猎炜胶塞，，，，，，，参与0.3mL左右的配套液体造就基，，，，，，，用无菌滴管反复吹吸，，，，，，，将冻干菌种溶化成为悬液，，，，，，，而后用无菌滴管或接种环移至斜面、平板或液体造就基，，，，，，，并连同渣滓菌悬液的西猎炜一路搁置于36℃造就箱中进行造就。。。。。。。(菌种与造就和保留步骤对应表见附表1，，，，，，，造就基、造就步骤和传代保留步骤见附表2)。。。。。。。

3 次日观察菌种的成长情况，，，，，，，如未成长，，，，，，，应持续造就24h，，，，，，，或汲取造就之后的菌悬液中再次接种造就基，，，，，，，造就24h观察。。。。。。。

4 菌株为一次性使用品，，，，，，，开启之后不能反复使用或保留，，，，，，，暂不开启的菌种应在4℃珍藏。。。。。。。

5 复苏后的菌种在传1-2代后使用，，，，，，，建议菌种使用5代后弃用。。。。。。。

注)：采办后请尽量实时使用冻干菌种，，，，，，，如发现菌种不活或传染等情况，，，，，，，请在采办之日起1个月内与我们联系。。。。。。。

冻干菌种铜绿假单胞菌 ATCC9027复苏示意图：

附表1 造就基、造就前提和保留步骤

步骤1：

无菌前提下，，，，，，，用无菌吸管往西猎炜冻干菌粉中参与脑心浸液造就基，，，，，，，充分悬浮后取适量的菌悬液于营养琼脂(022020)斜面上35-37℃划线造就24-48h。。。。。。。斜面(第一代)放于4℃冰箱保留，，，，，，，每个月转接一次，，，，，，，代数以此类推，，，，，，，建议使用菌种代数不超过5代，，，，，，，5代后菌种应销毁。。。。。。。

步骤2：

无菌前提下，，，，，，，用无菌吸管往西猎炜冻干菌粉中参与脑心浸液造就基，，，，，，，充分悬浮后取适量的菌悬液于营养琼脂(022020)斜面上划线35-37℃造就24-48h。。。。。。。斜面(第一代)放于25℃下保留，，，，，，，每个月转接一次，，，，，，，代数以此类推，，，，，，，建议使用菌种代数不超过5代，，，，，，，5代后菌种应销毁。。。。。。。

步骤3：

无菌前提下，，，，，，，用无菌吸管往西猎炜冻干菌粉中参与脑心浸液造就基，，，，，，，充分悬浮后取适量的菌悬液于血平板(024070)后涂布，，，，，，，35-37℃造就24-48h。。。。。。。平板(第一代)放于4℃冰箱保留，，，，，，，并用封口膜或其它封条密封平板，，，，，，，每半个月转接一次，，，，，，，代数以此类推，，，，，，，建议使用菌种代数不超过5代，，，，，，，5代后菌种应销毁。。。。。。。

步骤4：

无菌前提下，，，，，，，用无菌吸管往西猎炜冻干菌粉中参与脑心浸液造就基，，，，，，，充分悬浮后取适量的菌悬液于胰蛋白胨大豆酵母浸膏琼脂(TSA-YE)(026020)斜面上 35-37℃造就24-48h。。。。。。。斜面(第一代)放于4℃冰箱保留，，，，，，，每个月转接一次，，，，，，，代数以此类推，，，，，，，建议使用菌种代数不超过5代，，，，，，，5代后菌种应销毁。。。。。。。

步骤5：

无菌前提下，，，，，，，用无菌吸管往西猎炜冻干菌粉中参与脑心浸液造就基，，，，，，，充分悬浮后取适量的菌悬液于疱肉牛肉粒肉汤(027140)加液体石蜡1cm,35-37℃造就48-72h。。。。。。。肉汤(第一代)放于4℃冰箱环境下保留，，，，，，，每半个月转接一次，，，，，，，代数以此类推，，，，，，，建议使用菌种代数不超过5代，，，，，，，5代后菌种应销毁。。。。。。。

步骤6：

无菌前提下，，，，，，，用无菌吸管往西猎炜冻干菌粉中参与碱性蛋白胨水，，，，，，，充分悬浮后取适量的菌悬液于碱性琼脂(025040)斜面上35-37℃造就24-48h。。。。。。。斜面(第一代)放于25℃下保留，，，，，，，每个月转接一次，，，，，，，代数以此类推，，，，，，，建议使用菌种代数不超过5代，，，，，，，5代后菌种应销毁。。。。。。。

步骤7：

无菌前提下，，，，，，，用无菌吸管往西猎炜冻干菌粉中参与3%NaCl碱性蛋白胨水，，，，，，，充分悬浮后搁置于36℃下复苏8-12幼时。。。。。。。取适量的菌悬液于3%NaCl营养琼脂(营养琼脂(022020)参与2.5gNaCl/100mL)斜面上35-37℃造就24-48h。。。。。。。斜面(第一代)放于25℃下保留，，，，，，，每个月转接一次，，，，，，，代数以此类推，，，，，，，建议使用菌种代数不超过5代，，，，，，，5代后菌种应销毁。。。。。。。

步骤8：

无菌前提下，，，，，，，用无菌吸管往西猎炜冻干菌粉中参与沙氏液体造就基，，，，，，，充分悬浮后取适量的菌悬液于马铃薯葡萄糖琼脂 (PDA)(021050)斜面25-28℃造就2-5天。。。。。。。斜面(第一代)放于4℃冰箱保留，，，，，，，每两个月转接一次，，，，，，，代数以此类推，，，，，，，建议使用菌种代数不超过5代，，，，，，，5代后菌种应销毁。。。。。。。

步骤9：

无菌前提下，，，，，，，用无菌吸管往西猎炜冻干菌粉中参与布氏肉汤，，，，，，，充分悬浮后取适量的菌悬液于血平板(024070)42±1℃微需氧前提下造就48-72h。。。。。。。平板(第一代)放于4℃冰箱微需氧环境下保留，，，，，，，并用封口膜或其它封条密封平板，，，，，，，每个星期转接一次，，，，，，，代数以此类推，，，，，，，建议使用菌种代数不超过5代，，，，，，，5代后菌种应销毁。。。。。。。

步骤10：

无菌前提下，，，，，，，用无菌吸管往西猎炜冻干菌粉中参与TPY肉汤，，，，，，，充分悬浮后取适量的菌悬液于BBL琼脂(027330)斜面厌氧环境下35-37℃造就48h-72h。。。。。。。斜面(第一代)放于4℃冰箱厌氧环境下保留，，，，，，，每个星期转接一次，，，，，，，代数以此类推，，，，，，，建议使用菌种代数不超过5代，，，，，，，5代后菌种应销毁。。。。。。。

步骤11：

无菌前提下，，，，，，，用无菌吸管往西猎炜冻干粉中参与脱脂奶粉溶液，，，，，，，充分悬浮后取适量的菌悬液于脱脂奶粉溶液(10%)35-37℃造就48h-72h。。。。。。。 菌种(第一代)放于4℃冰箱保留，，，，，，，每两个星期转接一次，，，，，，，代数以此类推，，，，，，，建议使用菌种代数不超过5代，，，，，，，5代后菌种应消毁。。。。。。。