丽江乐投letou生物报路：肿瘤有关巨噬细胞（TAM）是与癌症转移有关的沉要免疫细胞。。。。。。。。不外，，，，，，，TAM是否在结直肠癌肝转移中起主导作用还不明显。。。。。。。。近日，，，，，，，首都医科大学的钻研团队在《Cancer Letters》杂志上发文称，，，，，，，表泌体miRNA通过加强巨噬细胞的M2极化，，，，，，，推进CXCL12/CXCR4-诱导的结直肠癌肝转移。。。。。。。。这些了局为预防结直肠癌转移提供了潜在的医治靶点。。。。。。。。

结直肠癌（CRC）是常见的消化路肿瘤，，，，，，，其发病率和殒命率在全球领域内呈上升趋向。。。。。。。。只管这种疾病的医治成效有了很大的改善，，，，，，，但由于产生肝转移，，，，，，，患者的预后依然很差。。。。。。。。据统计，，，，，，，约莫50%的结直肠癌患者在病程中出现肝转移，，，，，，，是导致患者殒命的重要原因。。。。。。。。

近期的多项钻研批注，，，，，，，CXCL12/CXCR4轴的激活在结直肠癌肝转移中起了关键作用，，，，，，，但具体机造还不大明显。。。。。。。。同时，，，，，，，基于癌症转移的“种子和泥土”理论，，，，，，，转移前niche的形成还必要肿瘤细胞与基质细胞之间的互换，，，，，，，以推进肿瘤的成长和发展。。。。。。。。肿瘤有关巨噬细胞在此过程中通常维持M2极化状态，，，，，，，以推进癌症转移。。。。。。。。

那么，，，，，，，推进巨噬细胞M2极化的信号来自哪里？？？？？？？？最近有人提出，，，，，，，癌症起源的表泌体（exosomes）通过转移miRNA来领导转移的器官偏差性。。。。。。。。简直，，，，，，，表泌体miRNA时时充任调节肿瘤成长、血管天生和转移的信号分子。。。。。。。。因而，，，，，，，钻研人员如果，，，，，，，表白CXCR4的结直肠癌细胞通过表泌体转移miRNA来推进巨噬细胞的M2极化，，，，，，，最终推进结直肠癌转移。。。。。。。。

高表白的CXCR4推进M2极化

为了索求CXCR4是否招募巨噬细胞并推进巨噬细胞的M2极化，，，，，，，钻研人员将CXCR4^+/-转基因幼鼠（肠路上皮细胞过表白CXCR4的幼鼠，，，，，，，由赛业生物提供）与Apc^Min/+幼鼠杂交，，，，，，，产生CXCR4^+/-Apc^Min/+复合突变幼鼠。。。。。。。。Apc^Min/+幼鼠的Apc存在生殖系突变，，，，，，，会导致幼鼠易患自觉性结肠和肠路肿瘤，，，，，，，因而，，，，，，，这种幼鼠可作为自觉性结肠癌模型，，，，，，，以鉴定CXCR4的促肿瘤作用。。。。。。。。

钻研人员发现，，，，，，，与Apc^Min/+幼鼠相比，，，，，，，CXCR4^+/-Apc^Min/+幼鼠的结肠腺瘤数量显著增长。。。。。。。。同时，，，，，，，CXCR4的高表白导致M2标志物CD163的表白显著增长，，，，，，，而CXCR4^+/-Apc^Min/+幼鼠的结肠粘膜中也观察到M2巨噬细胞的浸润增长。。。。。。。。有意思的是，，，，，，，CD163的表白重要位于结直肠癌的浸润前沿和基质。。。。。。。。这些了局批注，，，，，，，CXCR4的激活与TAM浸润强度的增长之间存在着潜在的关联。。。。。。。。此表，，，，，，，通过临床标本的分析，，，，，，，他们还发现CXCR4的表白与M2标志物CD206存在有关性，，，，，，，凸起了CXCR4在结直肠癌微环境中的潜在调节作用。。。。。。。。

来自肿瘤细胞的表泌体miRNA诱导M2极化

越来越多的钻研批注，，，，，，，癌细胞大量排泄表泌体，，，，，，，并将信号分子转移到周围细胞钟祝。。。。。。。为了鉴定那些导致巨噬细胞极化状态产生扭转的表泌体miRNA，，，，，，，钻研人员从习染了对照（HCT116-Control）、CXCR4慢病毒（HCT116-CXCR4）或经过CXCL12处置（HCT116-CXCR12）的HCT116细胞中分离出表泌体，，，，，，，并利用miRNA芯片发展分析。。。。。。。。他们发现，，，，，，，三种miRNA（miR-25-3p、miR-130b-3p和miR-425-5p）在来自HCT116-CXCR4 和HCT116-CXCL12细胞的表泌体中显著上调，，，，，，，批注这些miRNA是在CXCL12/CXCR4激活后高度上调的。。。。。。。。

为了证明这些miRNA可通过表泌体从结直肠癌细胞转移到巨噬细胞，，，，，，，他们用FAM象征的miRNA转染HCT116细胞，，，，，，，并与PMA诱导的THP-1细胞共造就24幼时。。。。。。。。通过共聚焦显微镜能够在巨噬细胞中检测到FAM象征的miRNA，，，，，，，这意味着miRNA能够通过表泌体从结直肠癌细胞转移到巨噬细胞。。。。。。。。之后，，，，，，，他们将幼鼠巨噬细胞和PMA诱导的THP-1细胞与来自HCT116-control、HCT116-CXCR4和HCT116-CXCL12的表泌体共同孵育，，，，，，，发现以上三种miRNA的水平在与HCT116-CXCR4 和HCT116-CXCL12表泌体孵育的巨噬细胞中显著上调（图1）。。。。。。。。

为了索求这些高度上调的表泌体miRNA对巨噬细胞极化的影响，，，，，，，钻研人员在经PMA诱导的THP-1细胞摄取表泌体后，，，，，，，测定了M2标志物（CD206和Arg-1）以及M1标志物（iNOS和TNFα）的表白水平。。。。。。。。与对照细胞相比，，，，，，，来自HCT116-CXCR4或HCT116-CXCL12细胞的表泌体显着增长了CD206和Arg-1的表白，，，，，，，同时降低了iNOS和TNFα的表白。。。。。。。。此表，，，，，，，miR-25-3p、miR-130b-3p和miR-425-5p的模拟物显著增长了M2标志物的表白，，，，，，，并降低了M1标志物的表白；；；；；；；而miRNA抑造剂则显著抑造了M2标志物的表白，，，，，，，显示了这些miRNA调节巨噬细胞极化的特异性。。。。。。。。

图1. miRNA被巨噬细胞吸收并引发M2极化表型。。。。。。。。

表泌体miRNA通过PTEN/PI3K/Akt信号通路推进M2极化

钻研人员随后利用miRNA指标预测算法来确定这些miRNA的潜鄙人游靶点，，，，，，，发现PTEN是它们的共同靶点。。。。。。。。为了确定这一点，，，，，，，他们别离用三种miRNA的模拟物和抑造剂来转染THP-1细胞，，，，，，，发现miRNA模拟物显著抑造了PTEN的表白，，，，，，，而miRNA抑造剂大大加强了PTEN的表白，，，，，，，其中miR-425-5p对PTEN的表白阐发出最强的负调控潜力，，，，，，，批注PTEN是这些miRNA的潜在靶点。。。。。。。。同样地，，，，，，，Akt的表白也受到这些miRNA的负向调控，，，，，，，批注PTEN/PI3K/Akt是协调巨噬细胞极化的关键信号通路（图2）。。。。。。。。

他们利用miR-25-3p、miR-130b-3p和miR-425-5p模拟物转染鼠巨噬细胞Raw264.7和PMA诱导的THP-1细胞，，，，，，，发现PTEN的表白显著降低以及PI3K-Akt信号通路的激活。。。。。。。。同时，，，，，，，c-Myc、STAT3和STAT6被激活并磷酸化，，，，，，，以加强巨噬细胞的M2极化。。。。。。。。与预期的了局一致，，，，，，，M1表型标志物iNOS的水平降低，，，，，，，而M2表型标志物Arg-1的表白大大增长。。。。。。。。这些了局批注，，，，，，，miR-25-3p、miR-130b-3p和miR-425-5p从结直肠癌细胞转移到巨噬细胞后，，，，，，，通过PTEN/PI3K/Akt信号通路协同加强了巨噬细胞的M2极化。。。。。。。。

 
图2. 表泌体miRNA通过PTEN/PI3K/Akt信号通路推进巨噬细胞的M2极化。。。。。。。。

M2极化的巨噬细胞推进EMT和血管天生

为了索求M2极化的巨噬细胞对结直肠癌侵袭和转移的影响，，，，，，，钻研人员将巨噬细胞与结直肠癌细胞共造就。。。。。。。。他们发现，，，，，，，转染miRNA模拟物后的THP-1和Raw264.7细胞显著加强了迁徙能力，，，，，，，并推进告终直肠癌细胞的上皮间充质转化（EMT）。。。。。。。。之后，，，，，，，通过细胞因子分析，，，，，，，他们发现经miRNA转染的Raw264.7细胞前提造就基中VEGF这种血管天生因子显著增长。。。。。。。。同时，，，，，，，血管形成尝试的了局也批注，，，，，，，M2极化巨噬细胞排泄的VEGF可显著推进HUVEC细胞的血管形成，，，，，，，批注促血管天生作用是巨噬细胞引发结直肠癌侵袭的机造之一。。。。。。。。

为了进一步评估表泌体miR-25-3p、miR-130b-3p和miR-425-5p在巨噬细胞表型转换中的作用，，，，，，，钻研人员以4:1的比例将结直肠癌细胞与转染了miRNA模拟物的巨噬细胞混合，，，，，，，而后将这些细胞注射到裸鼠的侧腹。。。。。。。。他们发现，，，，，，，这些巨噬细胞的共注射会导致异种移植瘤的体积显著增长。。。。。。。。并且，，，，，，，巨噬细胞的促肿瘤作用可通过IL-4的处置而得到加强。。。。。。。。之后，，，，，，，他们还发此刻转染miR-25-3p、miR-130b-3p和miR-425-5p的THP-1细胞中，，，，，，，幼鼠出现了更多的肝转移结节。。。。。。。。这些了局批注转染miRNA的巨噬细胞在体内推进了肿瘤进展和肝转移（图3）。。。。。。。。

图3. 转染miRNA的巨噬细胞推进了肿瘤进展和血管天生。。。。。。。。

血清中的表泌体miRNA与结直肠癌患者的转移有关

最后，，，，，，，为了确定结直肠癌患者血清中的表泌体miR-25-3p、miR-130b-3p和miR-425-5p水平是否升高，，，，，，，钻研人员从健全供体和结直肠癌患者的血清中提取出循环表泌体。。。。。。。。RT-qPCR显示，，，，，，，结直肠癌患者的循环表泌体水平上调。。。。。。。。并且，，，，，，，与没有转移的患者相比，，，，，，，转移性结直肠癌患者的循环表泌体中miR-25-3p和miR-130b-3p的水平升高。。。。。。。。这些数据批注，，，，，，，循环表泌体中的miR-25-3p、miR-130b-3p和miR-425-5p水平可作为预测结直肠癌患者进展和转移的非侵入性步骤。。。。。。。。

作者总结路：“我们证明，，，，，，，结直肠癌细胞在响应CXCL12/CXCR4激活时，，，，，，，通过表泌体转移一组miRNA（miR-25-3p、miR-130b-3p和miR-425-5p）而推进巨噬细胞的M2极化，，，，，，，从而加强EMT和结直肠癌肝转移（如下图所示）。。。。。。。。”他们以为，，，，，，，表泌体miRNA不仅能够作为预后的预测工具，，，，，，，还能够作为预防结直肠癌转移的潜在医治靶点。。。。。。。。

原文检索

D. Wang, X. Wang, M. Si, J. Yang, S. Sun, H. Wu, S. Cui, X. Qu, X. Yu, Exosome-encapsulated miRNAs contribute to CXCL12/CXCR4-induced liver metastasis of colorectal cancer by enhancing M2 polarization of macrophages, Cancer Letters,