乐投letou生物报路：钻研人员通常通过化学方式附着“荧光基团”来钻研蛋白质或氨基酸等生物分子，，，，，，当被引发后，，，，，，在高倍显微镜成像下，，，，，，这些荧光基团或标签会出现彩虹般的色彩，，，，，，能够示踪、能够援手检测疾病或鉴别遗传前提，，，，，，为钻研人员提供了丰硕的信息。。。。。。。。

一次要检测一种以上的分子——多沉检测，，，，，，必要使用发出分歧色彩光的其他类型的荧光基团。。。。。。。。但是在单分子水平上分辨分歧的色彩是极度难题的。。。。。。。。这就是为什么大无数显微镜只能看到三到四种色彩。。。。。。。。固然能够使用多种步骤来突破这种限度——例如沉复多轮象征成像洗脱，，，，，，或者使用更多激光器的复杂设置。。。。。。。。然而，，，，，，想要用一种单一而急剧的步骤来看到很多色彩依然是一个重要的挑战。。。。。。。。

芝加哥大学普利兹克分子工程学院的钻研人员在今天颁发在《Nature Nanotechnology》期刊上的一篇论文中概述了一种解决这一挑战的新步骤。。。。。。。。Squires尝试室概述的一项新技术，，，，，，仅使用三种单一的化学“模？？？？？？？椤薄狢y3，，，，，，Cy5和DNA，，，，，，设计出数十个“FRETfluor”标签，，，，，，能够用来象征更多种生物分子。。。。。。。。

“乐投letou步骤更单一。。。。。。。。这是一次象征，，，，，，一次成像，，，，，，”共同第一作者、芝加哥大学普利兹克分子工程博士候选人Jiachong Chu说。。。。。。。。这意味着你能够事半功倍。。。。。。。。目前，，，，，，乐投letou新技术是该领域最好的。。。。。。。。”

通往多沉检测的新蹊径

这一钻研领域的最终指标——PME团队的论文比以往任何时辰都更靠近的指标——是多沉检测。。。。。。。。

纽鲍尔家族分子工程助理教授 Allison Squires说:“多沉检测意味着可能在统一分析中检测不止一种分子，，，，，，你可能有10种、50种或数百种分歧的蛋白质想要鉴别。。。。。。。。”“有了这项新技术，，，，，，我们能够检测几十个。。。。。。。。我相信我们能够将其扩大到数百个。。。。。。。。”

为了应对这一挑战，，，，，，Squires尝试室团队发现了一种创新的新步骤，，，，，，使用一种成熟的技术：荧光共振能量转移（FRET，，，，，，F?rster resonance energy transfer）。。。。。。。。FRET是一种描述能量若何在光敏分子之间传递的机造——一个荧光分子（供体）在被引发后，，，，，，通过偶极相互作用，，，，，，将其引发态能量非辐射地转移到一个极度邻近的分子（受体），，，，，，使得受体分子引发，，，，，，而供体分子回到基态。。。。。。。。钻研人员能够利用这个步骤汇报两个分子何时靠近相互作用、衡量分子分歧部门之间的距离。。。。。。。。这一景象由德国物理学家Theodor F?rster在1948年提出。。。。。。。。

“这个项目以一种新的方式利用了FRET，，，，，，”第一作者之一、化学博士候选人Ayesha Ejaz说。。。。。。。。FRET通常用于丈量距离和观察生物分子的动力学。。。。。。。。我们扭转了供体和受体染料之间的间距，，，，，，以创造分歧的FRET效能和其他个性，，，，，，我们用这些个性来鉴别分歧的结构。。。。。。。。”

PME团队的钻研中使用的27个标签是27个“FRETfluors”，，，，，，他们使用DNA，，，，，，绿色荧光基团Cy3和红色荧光基团Cy5，，，，，，进行组合设计。。。。。。。。作者起初创建了一系劣装ABN”结构，，，，，，将非磺化的Cy3和Cy5别离整合到“A”和“B”DNA链中，，，，，，由6≤N≤20的N碱基对分隔(图1a显示AB9，，，，，，ABN的N可所以6-20)。。。。。。。。下方的“桥”链用于对核酸靶点进行序列特异性象征或增长用于常见象征化学的官能团。。。。。。。。除了ABN，，，，，，作者通过批改Cy3供体的DNA序列和衔接化学键，，，，，，以及增长额表的Cy3，，，，，，构建了与ABN拥有分歧光物理性质的其他FRETfluor类型(图1b)。。。。。。。。与ABN结构相比，，，，，，ABsk的Bsk短缺Cy3和Cy5的未配对碱基，，，，，，降低了Cy3的寿命和量子效能。。。。。。。。AcB的Ac在5 '端携带额表的单个Cy3，，，，，，增长了亮度，，，，，，降低了Cy3的净寿命。。。。。。。。ABin的Bin在桥链的3′端和B链的5′端之间参与了一个额表的Cy3，，，，，，增长了亮度，，，，，，但对Cy3的净寿命仅略有影响。。。。。。。。Cy3和Cy5荧光基团的数量变动、荧光基团之间的距离奥妙变动，，，，，，都影响能量传递效能而导致产生可能分辨的分歧光物理性质，，，，，，除了发出分歧色彩的光，，，，，，每一种FRETfluor都阐发出其他可调整的个性，，，，，，这些个性使得钻研人员能够在不到一秒的功夫内鉴别出极低浓度下的FRETfluor。。。。。。。。

FRETfluor设计使用至少的构建模？？？？？？？椋―NA和两种荧光基团），，，，，，利用染料光物理的位点特异性可调谐性作为额表的多沉维度，，，，，，从而组合扩大FRET的多沉检测能力。。。。。。。。

Ejaz说：“通常，，，，，，当人们想要同时观察多种组分，，，，，，好比一个细胞的分歧部门，，，，，，他们会用分歧的荧光标签给每个成分贴上分歧的标签，，，，，，发出特定色彩的光。。。。。。。。但可同时用的荧光标签仅限于四到五种色彩，，，，，，”“若是能够使用FRETfluor，，，，，，那么我们能够增长可用于荧鲜明微镜的'色彩'的数量。。。。。。。。我们目前在测试FRETfluor在分歧类型的尝试和环境中的工作情况，，，，，，这将使我们更好地相识所有的可能性。。。。。。。。”“这项钻研的一个可能的将来方向是最终用这些FRETfluor取代通常的荧光基团标签。。。。。。。。

活络和单一

新的多沉检测技术的吸引力重要来自于活络度和单一性。。。。。。。。“每幼我都想让自己喜欢的分析可能多沉化。。。。。。。。”其功夫充；；；；；；；；蛘哐静换岜涠蹦芄谎∪『枚啻送獠街琛！。。。。。。“我们要解决的，，，，，，是当你没有太多功夫，，，，，，。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。；；；；；；；；蛘吣阒挥泻苌僖坏阊尽⒌泵扛龇肿恿鞴愕耐肥蹦阒挥幸淮位隼醇鹚鞘薄！。。。。。。我们能够在不到一秒的功夫内鉴别出低至数十飞摩尔浓度（femtomolar）的FRETfluors。。。。。。。。”

单一也是关键——能够使用通常的化学试剂来构建FRETfluors，，，，，，能够用一种只必要单路激光就能读取的技术。。。。。。。。“我们只象征指标一次，，，，，，只做一次读数，，，，，，”Chu说。。。。。。。。“在这种情况下，，，，，，我们能够同时创建和使用27个分歧的标签。。。。。。。。”

Squires描述了现有技术若何与FRETfluors一路使用，，，，，，以获得更多的多沉检测的益处——“你能够引入特殊的激光引发规划，，，，，，或者结合其他性质略有分歧的荧光基团”——这将提高现有标签的读数。。。。。。。。Squires说，，，，，，将这些多沉检测工具利用到他们更壮大的新技术中，，，，，，能够启发新的钻研和利用领域。。。。。。。。“成像和基于流动的生物医学分析的这些改进将使下一代创新成为可能。。。。。。。。”