中文名称:5×蛋白上样缓冲液(含巯基还原剂)
英文名称:SDS-PAGE loading buffer,5×(with β-Mercaptoethanol)
规格 :5ml
保留前提:Store at -20 °C for one year.
产品介绍:
本产品合用于SDS-PAGE(SDS变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。。。。。其重要成份为SDS,,,,,,,,β-巯基乙醇,,,,,,,,溴酚蓝,,,,,,,,缓冲盐溶液等。。。。。 SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷,,,,,,,,这时蛋白质自身的电荷齐全被SDS覆盖,,,,,,,,解除了各类蛋白质自身电荷的差距,,,,,,,,SDS还能够断开分子内和分子间的氢键,,,,,,,,粉碎蛋白质分子的二级和三级结构;;;;;;;β-巯基乙醇能够断开半胱氨酸残基之间的二硫键,,,,,,,,粉碎蛋白质的四级结构,,,,,,,,解除了蛋白结构之间的差距。。。。。最终无电荷及结构上差距的蛋白(亚单元),,,,,,,,电泳速度只是与其分子量大幼有关;;;;;;;溴酚蓝用作电泳时的批示剂,,,,,,,,可或许批示电泳实现的功夫。。。。。
使用介绍:
1. 按每4微升蛋白样品参与1微升蛋白上样缓冲液的比例,,,,,,,,混合蛋白样品和蛋白上样缓冲液(5X)。。。。。
2. 混匀后,,,,,,,,100℃水浴加热3-5分钟,,,,,,,,使蛋白充分变性。。。。。
3. 冷却到室温后,,,,,,,,10000-14000rpm离心2-5分钟,,,,,,,,取上清直接上样电泳即可。。。。。
4. 通常电泳时染料达到胶的底端左近(0.5-1cm)即可终场电泳。。。。。
当苦衷项:
1. 上样缓冲液分为还原型和非还原型两种,,,,,,,,还原型上样缓冲液中含肯定量的DTT或巯基乙醇,,,,,,,,有轻微刺激性气味,,,,,,,,较易分辨。。。。。
2. 还原型上样缓冲液中的巯基可使蛋白分子的链内二硫键和链间二硫键断裂,,,,,,,,使通过二硫键衔接的各亚单元彼此分离,,,,,,,,在电泳凝胶上显露多个蛋白条带,,,,,,,,选购和使用时请务必注明,,,,,,,,仔细分辨。。。。。
3. 本试剂因含β-巯基乙醇,,,,,,,,有肯定的毒性,,,,,,,,为了您的安全和健全,,,,,,,,请穿尝试服并戴一次性手套操作。。。。。
4. 蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝批示剂,,,,,,,,PH值受保留温杜装响,,,,,,,,在低温冻存状态下,,,,,,,,溶液可能会出现深棕色,,,,,,,,不影响产品使用。。。。。