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ELISA尝试过程中常见问题与解决步骤
ELISA步骤尝试常;;;;岢鱿忠恍┝司植缓玫木跋,,,,,,丽江乐投letou生物技术部总结了常见的几大类问题和对应的解决规划,,,,,,具体如下:
一、ELISA尝试了局显色淡、 活络度偏低
可能原因与具体解决法子如下:
1、试剂盒在运输途中功夫太长,,,,,,温度太高
解决法子:尽量缩短运输功夫,,,,,,夏季应放冰块降温
2、试剂盒未充分平衡
解决法子:试剂盒从2~8℃冰箱取出后打开盒盖,,,,,,于室温平衡至少
20分钟,,,,,,确保所有试剂已平衡至室温(约25℃) 。。。。。
3、造就箱温度不及37℃
解决法子:把稳造就箱温度,,,,,,放入反映板后尽量削减开启次数以免
影响温度恒定,,,,,,非隔水式造就箱尤其该把稳
4、保温功夫不及
解决法子:校对按时钟正确按时
5、洗涤时冲击力太大、浸泡功夫过长、洗涤次数增长
解决法子:按说明书要求保留洗涤功夫,,,,,,正确记住洗涤次数
6、移液器吸液量不及,,,,,,吸嘴内壁挂水太多或内壁不清洁
解决法子:校对移液器,,,,,,吸嘴要配套,,,,,,装吸嘴时要缜密,,,,,,吸嘴内壁
要清洁,,,,,,最好一次性使用
7、蒸馏水水质有问题
解决法子:使用新鲜合格的蒸馏水
8、底物作用功夫不及
解决法子:正确按时
二、布景深全数呈有色
可能原因与具体解决法子如下:
1、洗涤不充分,,,,,,洗后未拍干,,,,,,样品中其它成分残留或酶象征物残留
解决法子:
浓缩洗液正确配造;;;;;10倍浓缩洗涤液如有结晶则应让结晶于室温全数溶化后再量取稀释;;;;;充分洗涤,,,,,,彻底拍干。。。。。加样或加酶拍板的滤纸应弃去不用,,,,,,不要反复使用,,,,,,不然易造成传染
2、样品传染
解决法子:
样品应新鲜采集,,,,,,或低温保留,,,,,,预防传染
3、造就箱温度超过37℃或反映功夫过长
解决法子:调整造就箱温度,,,,,,正确按时
4、吸嘴沉复使用,,,,,,未洗净或消毒不彻底
解决法子:吸嘴尽可能一次性使用
5、蒸馏水被传染
解决法子:使用新鲜蒸馏水
6、酶等试剂混用
解决法子:分歧批号试剂勿混用
7、一次尝试的标本量过多,,,,,,加样功夫太长,,,,,, 导致现实反映功夫耽搁
解决法子:合理铺排尝试,,,,,,预防几块酶标板同时加样
三、沉复性欠安
1、样品数量几多不一,,,,,,加样功夫有长有短
解决法子:沉复某一样品时,,,,,,加样功夫尽可能与第一次靠近
2、保温功夫不一致,,,,,,洗涤前提不一致,,,,,,操作人员不一致
解决法子:沉复测定标本,,,,,,操作前提、人员蹬爪尽可能与上次维持
一致,,,,,,以排除这些成分造成的不一致的可能性
3、加样量不一致
解决法子: 样品稀释前应充分混匀,,,,,,尽可能使用统一移液器并装紧吸嘴
四、出现白板阳性对照不显色
1、显色液变质
解决法子:更换新的显色液
2、洗涤液配造有误
解决法子: 请按说明书所示稀释倍数配造
3未加酶结合物而以为已参与
解决法子: 把稳不要漏加
4、终止液误作洗涤液稀释或当底物液使用
解决法子: 每次加液前均应看清标签。。。。。
丽江乐投letou生物专业研发出产ELISA试剂盒,,,,,,如您采办我公司试剂盒后在尝试过程中,,,,,,遇到任何解决不了的问题,,,,,,都能够随时电话反馈到我们技术部,,,,,,我们将第一功夫助您解决,,,,,,助您售后无忧!